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　　當(dāng)實(shí)體組織被分散成單細(xì)胞時(shí)，分離方法可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的性質(zhì)產(chǎn)生瞬時(shí)或持續(xù)的影響，例如，表面可見(jiàn)的細(xì)胞膜損傷，細(xì)胞表面會(huì)出現(xiàn)泡狀現(xiàn)象，以及線粒體活性很難觀察到的變化，蛋白質(zhì)的丟失等等狀況，而細(xì)胞的損傷則受許多因素的影響，比如溫度，pH，處理時(shí)間等等。那對(duì)單細(xì)胞懸液制備方法有哪些？

　　酶消化法是實(shí)體組織向單細(xì)胞分散的主要方法之一。常見(jiàn)的酶有：鏈霉蛋白酶，胃蛋白酶，中性蛋白酶，胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，溶菌酶，彈性蛋白酶等，所使用的酶可以根據(jù)分散的組織類型進(jìn)行確定。 但需注意其使用條件和影響因素，胃蛋白酶在堿性環(huán)境下會(huì)失去活性，胰蛋白酶在中性溶液中活性會(huì)缺失等。

　　酶的原理有三個(gè)主要的方面：破壞組織間的膠原纖維，彈性纖維等，水解組織細(xì)胞與結(jié)構(gòu)緊密結(jié)合的蛋白，水解粘多糖的組織細(xì)胞。

細(xì)胞組織在酶消化法下的操作：

　　1、在離心管中放置適合進(jìn)行酶消化的組織。

　　2、向含有消化組織的試管中加入1~2ml選定的酶溶液。

　　3、在恒溫37攝氏度的環(huán)境中常規(guī)消化20～30min，間歇振蕩或吹氣消化。

　　4、收集細(xì)胞懸浮物，用尼龍網(wǎng)過(guò)濾，去除細(xì)胞，低速離心去除細(xì)胞碎片。

　　5、加入2ml的pbs攪拌均勻，離心丟棄并清除。然后再加入0.5毫升的PBS使細(xì)胞重懸。

　　6、熒光標(biāo)記后，制備好的單細(xì)胞懸液將被檢測(cè)或儲(chǔ)存以備后用。

　　其實(shí)對(duì)于單細(xì)胞懸液制備方法還有很多，今天小編給你們列舉的只是其中之一。你還知道哪些有關(guān)于單細(xì)胞進(jìn)行懸液制備的方法呢，不如在評(píng)論中來(lái)給我們一起分享啊。