實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>此次實(shí)驗(yàn)選用小鼠胰腺作為樣品組織,以便在制備小鼠胰腺樣品的單細(xì)胞懸液后進(jìn)行單細(xì)胞測(cè)序分析
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK
小鼠胰腺樣品前處理懸液制備的實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1.提前冰浴解凍消化酶和終止液;
2.打開(kāi)熱板加熱和模塊加熱,將設(shè)備加熱到37℃;
3.小鼠處死后取小鼠胰腺;
4.小鼠胰腺經(jīng)過(guò)DPBS清洗后,用紙擦干,剪成黃豆粒大??;
5.將處理后的小鼠胰腺放入消化管中,加入消化酶,上機(jī)靜置3min后使用程序2進(jìn)行消化25分鐘;
6.程序結(jié)束后取出,使用40μm篩網(wǎng)過(guò)濾
7.離心、裂紅、重懸;
8.使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)細(xì)胞活率,活率為81%。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1.清洗使用沒(méi)有Ca2+和Mg2+離子的DPBS
2.提前將儀器加熱,酶和終止液提前解凍
3.后續(xù)做單細(xì)胞測(cè)序的單細(xì)胞懸液過(guò)濾需要使用40μm篩網(wǎng)
實(shí)驗(yàn)操作圖:
樣品前處理懸液制備實(shí)驗(yàn)效果圖:
實(shí)驗(yàn)結(jié)果信息:
單細(xì)胞懸液制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代單細(xì)胞細(xì)胞懸液制備設(shè)備,主要應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測(cè)序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn),具有起始組織量小,時(shí)間短,細(xì)胞得率高,細(xì)胞活性高等性能特點(diǎn)。