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　　在單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序?qū)嶒?yàn)操作中，很多都是需要從各種生物樣本細(xì)胞中制備細(xì)胞懸液；而針對(duì)不同的生物樣本類型，如何獲取到活性高、完整性好、結(jié)團(tuán)率低的單細(xì)胞懸液，這是單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。那對(duì)于小鼠肝腎脾樣品的細(xì)胞懸液實(shí)驗(yàn)操作該如何進(jìn)行呢？

　　實(shí)驗(yàn)設(shè)備：單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-48WK

　　小鼠肝腎脾樣品的細(xì)胞懸液制備實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

　　1.打開儀器開關(guān)，打開加熱模塊，加熱

　　2.取活體組織后，放入PBS液中去紅，然后取20-50mg，分成6-8等分

　　3.用移液器把消化酶加入2ml的研磨套裝管中，將加滿消化酶的離心管放入預(yù)熱模塊中預(yù)熱3-5分鐘

　　4.將處理好的組織用鑷子轉(zhuǎn)移到加滿消化酶的離心管中

　　5.將裝有消化酶和組織的離心管放置到加熱板中，選擇25分鐘程序，開始運(yùn)行

　　6.程序結(jié)束取出離心管，將消化好的組織液轉(zhuǎn)移到過(guò)濾管中，即得到一管單細(xì)胞懸液

　　小鼠肝腎脾樣品細(xì)胞懸液制備實(shí)驗(yàn)前后對(duì)比效果圖：

　　樣品懸液制備的實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

　　1、消化酶和終止液均需要在冷凍環(huán)境下保存。

　　2、消化酶解凍時(shí)需在常溫條件下解凍，不可以放入水浴或者其他加熱儀器中解凍，溫度升高對(duì)酶的活性會(huì)有很大的影響。

　　從新鮮組織中制備高活性和高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液是單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序至關(guān)重要的一步，很多單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)折戟在此。常見(jiàn)的問(wèn)題諸如細(xì)胞活性低，細(xì)胞背景不干凈，細(xì)胞碎片多，細(xì)胞結(jié)團(tuán)率高等。科研者單細(xì)胞懸液制備儀具有組織高利用率、單細(xì)胞化過(guò)程高效、細(xì)胞活性高的特點(diǎn)，常應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測(cè)序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)。